PRÉDIOS HISTÓRICOS DE ASSARÉ Prof. Francisco Leite.pdf
Cromatografia Líquida Classica
1.
2. O marco da invenção da cromatografia foi atribuída ao
botânico Russo Mikhail Semyonovich Tswett, em
relatórios publicados entre os anos de 1906 e 1906;
Durante estudos botânicos, ele descobriu que a
clorofila era composta por mais de um corante, e que
passando-a por um tubo com éter de petróleo, ele
registrou que as misturas se separavam
gradativamente entre uma fase fixa de Carbonato de
Cálcio (CaCO3);
Foi também o primeiro a usar o termo Cromatografia,
em seu relatório publicado no Jornal Alemão de
Botânica;
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3. É um método físico-químico de separação de
componentes de uma mistura, realizada através da
distribuição desses componentes, em uma fase
estacionária;
A fase móvel move-se através da fase estacionária,
sendo arrastada pela força da gravidade, de modo
que um ou mais componentes desta mistura sejam
retidos pela fase estacionária;
Existem diversas formas de se realizar o processo,
sendo a líquida considerada clássica e predecessora
de todas as outras;
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4. Amplamente usada para separação de misturas
complexas e em sua purificação, a cromatografia
permite que essas fases sejam completamente
classificadas e separadas;
Podem ser usadas na industria química,
alimentícia, bioengenharia, laboratórios de
análises químicas e diversas outras;
Permite as análises qualitativas e quantitativas de
materiais orgânicos e inorgânicos em diversas
amostras;
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5. CROMATOGRAFIA POR TROCA IÔNICA
Baseia no principio de diferença de cargas entre a
fase estacionária e a fase móvel;
Usa-se da diferença eletrostática entre os
componentes da matriz e da fase móvel, sendo
possível controlá-la utilizando fatores como pH e força
iônica (Potencial de Ionização);
A coluna pode ser reutilizada, usando o eluente inicial
como calibrador;
A matriz é composta material poroso, natural ou
sintético, como por exemplo carboximetilcelulose
(carga -) e dietilaminoetilcelulose (carga +);
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7. CROMATOGRAFIA POR ADOSRÇÃO
É baseada em uma fase estacionaria solida que
adsorve (prende) certas moléculas de forma não
covalente com outras moléculas situadas numa
matriz insolúvel em água.
Este tipo de cromatografia usa-se principalmente
em bioquímica para isolar enzimas e para separar
moléculas da membrana celular.
Em geral, substâncias solúveis em solventes
orgânicos são melhor separadas na cromatografia
por adsorção
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9. CROMATOGRAFIA POR EXCLUSÃO
É utilizada na separação de componentes pelo
tamanho molecular;
Apresenta duas fases:
Fase móvel pode ser um líquido ou um gás;
Fase estacionaria que pode ser um polímero ou um
gel com poros de tamanhos controlados;
Promove uma distribuição seletiva e dinâmica das
moléculas;
Esta técnica utiliza-se em bioquímica para separar
proteínas e bioestruturas de grandes dimensões;
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11. CROMATOGRAFIA POR PARTIÇÃO
Também chamada de Cromatografia líquido- líquido;
Usa a distribuição de acordo com a solubilidade
relativa das moléculas da fase estacionária e móvel.
Tem como suporte para a FE um sólido inerte, como
sílica gel.
Quando a FE for apolar, os solutos polares serão
primeiramente separados; No caso contrário, os
solutos polares serão os primeiros a serem eluidos;
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12. Usada para a separação de vários componentes
orgânicos, como hidrocarbonetos saturados,
xilenos, dioxano, clorofórmio e cloreto de
metileno.
Para evitar a perda da fase estacionário, é
indicado que ela seja ligada ao suporte inerte,
dando a este tipo de cromatografia de partição o
nome de cromatografia de fase ligada.
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14. Os materiais utilizados são relativamente simples
e de fácil manuseio:
Coluna cromatográfica – Feita de vidro e com
diâmetros diversos;
Fase estacionária – Suporte sólido, também varia
de acordo com a análise: sílica gel, alumina
(Óxido de Alumínio), Carbonato de Cálcio,
Eluentes – Podem ser solventes orgânicos ou
inorgânicos, água, álcool, cetonas e etc...
Béqueres, Pipetas, Algodão e Suporte;
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16. VANTAGENS:
Alto poder de resolução;
Separações eficientes e específicas;
Exige treinamento técnico para uso;
Análise quantitativa e qualitativa;
Baixo custo em relação aos métodos mais modernos;
DESVANTAGENS:
Separações demoradas, devido ao uso somente da
força da gravidade;
Precisa de métodos auxiliares, como a
espectrofotometria para as determinações qualitativas
das amostras.
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17. 1 – Relacione:
1 – Cromatografia por partição
2 – Cromatografias por exclusão
3 – Cromatografias por adsorção
4 – Cromatografias por troca iônica
( ) Usa a diferença eletrostática das moléculas para separar as
misturas;
( ) Sua fase estacionária é feita de material poroso, cuja
seletividade se dá pelo tamanho molecular;
( ) Os coeficientes de solubilidade são o fator principal de
afinidade entre a fase móvel e a estacionária;
( ) A Fase estacionária irá interagir com a fase móvel através de
interações fracas de seus componentes.
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18. 2 – O que é a cromatografia?
3 – Analise as seguintes afirmações:
I – Toda cromatografia usará somente um tipo específico de fase móvel, visto
que a separação independe do solvente usado e da coluna.
II – A Cromatografia é um método qualitativo e quantitativo, usado em diversas
análises.
III – A maior desvantagem da cromatografia líquida consiste no tempo gasto
para fazer a separação dos materiais, visto que se usa a força da gravidade
para arrastas a amostra pela coluna.
IV - A cromatografia é usada para a separação somente de materiais
inorgânicos, não sendo
possível separação de moléculas como proteínas e outros biocompostos.
Estão corretas:
A) I, II e III
B) I e IV
C) Somente II
D) II e III
E) Somente IV
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19. BRAITHWAITE, A.; SMITH, F. J. Chromatographic Methods. 5.
ed. London: Blackie Academy & Professional, 1996. 559 p.
COLLINS, Carol H.; BRAGA, Gilberto L.; BONATO, Pierina
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Unicamp, 1997. 279 p.
COLINS, Carol H.. Separações em colunas abertas:
cromatografia por exclusão e por bioafinidade. Campinas:
Periódico: Scientia Chromatographica, 2011. 2 p. Disponível
em:<http://www.scientiachromatographica.com/files/v3n2/v
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20. MENDHAM, J et al. Análise Química Quantitativa. 6. ed. Rio de
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2004. 111 p.
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Revista Virtual de Química, 2015. 47 p. Disponível em:
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Acesso em: 04 maio 2015.
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